Text
Produksi, karakterisasi, dan uji stabilitas protein fim-c inclusion bodies salmonella typhi
ABSTRAK
IDA SETIANINGSIH. Produksi, Karakterisasi, dan Uji Stabilitas Protein Fim-C Inclusion Bodies Salmonella typhi. Skripsi. Jakarta: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Negeri Jakarta. 2015.
Sampai saat ini vaksin tifus dan metode diagnostik demam tifoid dengan spesifisitas dan sensitivitas yang tinggi masih terus dikembangkan. Tujuan penelitian ini untuk mendapatkan protein rekombinan Fim-C Inclusion Bodies bakteri Salmonella typhi sebagai kandindat vaksin dan alat deteksi penyakit tifus melalui overekspresi bakteri rekombinan E. Coli BL21 (DE3) pLyss pET-30a-fim-C-S. typhi, mendapatkan informasi karakter dan stabilitas protein rekombinan Fim-C Inclusion Bodies. Proses overekspresi dilakukan dengan menambahkan inducer IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) 0.5 mM ke dalam biakan bakteri dengan waktu inkubasi 4 jam. Protein hasil overekspresi yang didapatkan dimurnikan menggunakan resin Ni-NTA. Karakterisasi protein rekombinan Fim-C dilakukan dengan menggunakan metode SDS-PAGE dan Western Blot. Uji stabilitas dilakukan dengan pengukuran konsentrasi protein Fim-C Inclusion Bodies S. typhi yang dilakukan setiap seminggu sekali selama satu bulan pada variasi suhu penyimpanan protein yaitu -20ºC, 4ºC dan 25ºC. Overekpresi 250 mL kultur menghasilkan 18 mL protein murni Inclusion Bodies. Hasil karakterisasi SDS-PAGE menunjukkan pita overekspresi protein rekombinan Fim-C Inclusion Bodies pada ukuran ±31 kDa. Uji aktivitas yang dilakukan dengan metode Western Blot menunjukkan terjadinya interaksi antigen spesifik Fim-C Inclusion Bodies terhadap Antibodi Anti Fim-C dibuktikan dengan terbentuknya warna coklat pada membran nitroselusosa. Hasil uji stabilitas memberikan informasi mengenai suhu penyimpanan yang paling stabil untuk protein rekombinan Fim-C Inclusion Bodies adalah -20ºC.
Kata kunci: Salmonella typhi, Protein rekombinan Fim-C Salmonella typhi, Overekspresi protein rekombinan, gen fim-C Salmonella typhi.
Bibliografi : lembar 75-78
Tidak tersedia versi lain